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要控制實驗室的無菌環境,可以遵循以下步驟和要點,以確保實驗環境的無菌性和實驗結果的準確性:
一、無菌室的設計與管理
無菌室的要求:
無菌室應矮小、平整,高2.2~2.3米,內部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,便于擦洗及殺菌。
無菌室周圍需設緩沖走廊,走廊旁再設緩沖間,其面積可小于無菌室。
無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜,其電源開關均應設在室外。
無菌室與緩沖間進出口應設拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。
建立管理制度:
制定并遵守無菌室管理制度,確保所有進入無菌室的人員都了解并遵循相關規定。
二、無菌室的潔凈度要求
環境潔凈度:
無菌操作間應滿足相應潔凈級別的操作環境,環境應符合萬級潔凈度要求。具體標準為每立方米直徑大于等于0.5微米的塵埃粒子數應小于等于350000個,30分鐘塵降菌落數小于等于3cfu/立方米。
無菌室的空間潔凈度應達到10000級,但操作區域如超凈工作臺、生物安全柜里需要達到潔凈度100級。
定期檢測:
對于無菌室的潔凈度,應定期進行檢測,以確保其始終滿足實驗要求。
三、無菌實驗流程
實驗前準備:
對實驗臺、手、檢驗用具進行消毒,確保無菌環境和無菌實驗用品。
防護衣服、口罩、手套等必須佩帶,以減少微生物污染的風險。
實驗操作:
在進行接種或向培養皿內倒培養基時,試管口或瓶壁外面不要接觸皿底,試管或瓶口應傾斜一下在火焰上通過,以減少污染的風險。
四、物品消毒
物品消毒:
所有進入無菌環境的物品都必須經過嚴格的消毒處理,包括實驗用具、培養基、檢驗樣品等。
五、其他措施
空氣流通:
無菌室內應保持良好的空氣流通,避免空氣死角,減少微生物滋生的機會。
紫外線照射:
定期使用紫外線燈對無菌室進行照射消毒,以殺滅空氣中的微生物。
使用無菌技術:
在實驗操作過程中,應使用無菌技術,如無菌稱樣、無菌接種等,以防止微生物的污染。
定期清潔與消毒:
定期對無菌室進行清潔和消毒,包括地面、墻面、天花板、設備表面等,以保持其無菌狀態。
通過遵循以上步驟和要點,可以有效地控制實驗室的無菌環境,確保實驗的準確性和可靠性。